Hiljuti algatas üks tuntud imiku piimasegu ettevõte{0}} ennetavalt oma imiku piimasegu kogu maailmas ennetava tagasikutsumise pärast.Bacillus cereusavastati selle tooraines. Võimalike ohtude kiirem, õigeaegne ja täpsem tuvastamine on muutunud nii tööstusahela eelnevate kui ka järgnevate sektorite ühiseks probleemiks.
MIRA-LFD pakub tehnilist lahendust Bacillus cereuse kiireks tuvastamiseks kohapeal, viies täieliku testimise lõpule 25 minutiga, tõhusalt ja täpselt! Seda saab paindlikult rakendada erinevates stsenaariumides, sealhulgas tootmiskohtades, tarneahela jälgitavuses ja tollikontrollis.
Ajakiri Foods avaldas artikli pealkirjaga „Super{0}}Bacillus cereuse ülikiire tuvastamine tselluloosi filterpaberi-põhise DNA ekstraheerimise, mitme ensüümi isotermilise kiire võimenduse ja külgvoolu mõõtevarda (MIRA{2}}LFD) kombineerimise teel”.
Selles uuringus töötati välja lihtne ja ülikiire meetod B. cereuse tuvastamiseks, mis ühendab tselluloosfilterpaberil-põhineva DNA ekstraheerimise, multiensüümi isotermilise kiire amplifikatsiooni (MIRA) ja külgvoolu mõõtevarda (LFD) tehnoloogia. Algselt võeti filterpaberi DNA ekstraheerimise efektiivsuse hindamiseks kasutusele PCR, millele järgnes lüüsivalemi ja ekstraheerimistingimuste optimeerimine. Ülaltoodud optimeerimisega
DNA, mida saab kasutada järgnevaks nukleiinhappe amplifikatsiooniks, saab kätte 3 minuti jooksul. Seejärel loodi MIRA-LFD isotermiline amplifikatsioon ja optimeeriti tuvastamise spetsiifilisuse ja tundlikkuse hindamiseks. Lõpuks rakendati väljatöötatud meetodit B. cereuse tuvastamiseks keedetud riisi proovides. Tulemused näitasid, et kogu MIRA-LFD võimendusprotseduur kestab 39 °C juures vaid 15 minutit. Tkogu ülikiire tuvastamise süsteem sai lõpule viia vähem kui 20 minutiga alates DNA ekstraheerimisest kuni tulemuste tõlgendamiseni, mis saavutas tuvastamispiiriks 12 fg/µL DNA kontsentratsiooni, mis vastab ligikaudu 115 CFU/ml tegelikes proovides.
Selles uuringus kasutati B. cereuse visuaalseks tuvastamiseks tselluloosfilterpaberil{0}}põhinevat DNA ekstraheerimist koos MIRA-LFD-ga. Tuvastamise saab lõpule viia vähem kui 20 minutiga alates DNA ekstraheerimisest kuni tulemuse määramiseni. Selles uuringus ühendati DNA ekstraheerimine ja kiire amplifikatsioon ning tulemusi oli võimalik jälgida palja silmaga ilma suuremahuliste instrumentideta, mida on lihtne kasutada, kiire ja mis on kooskõlas väljaspool laboratooriumi toimuvate välikatsetega.
Selles uuringusMIRA DNA isotermilise kiire amplifikatsiooni komplekt (nukleiinhappe testriba)jaNukleiinhappe testriba kasutati.
MIRA DNA isotermilise kiire amplifikatsiooni komplekt (nukleiinhappe testriba):
- Pidev temperatuurivõimendus 20 minutiks, kiire ja tõhus, minimaalne sõltuvus seadmetest
- Tuvastamispiir 1-5 koopiat/μL, kõrge spetsiifilisus
- Lüofiliseeritud reaktiive, mida on lihtne kasutada, saab hoida ja transportida toatemperatuuril
- Erinevad reaktiivivormid erinevate töövajaduste rahuldamiseks
Nukleiinhappe testriba:
- Ühe-/kahe-/kolmekordne tuvastamine
- Optimeeritud MIRA metoodika alusel, paremini kohandatav
- MIRA tehnoloogia kombineerimine, tuues esile mugavuse eelised
MIRA (mitmeensüümne isotermiline kiire nukleiinhappe võimendamine)tehnoloogia sobib ideaalselt kohapeal{0}}kiireks nukleiinhapete tuvastamiseks.
MIRA suudab saavutada kiire nukleiinhappe tuvastamise 5–20 minutiga. Seda on lihtne kasutada ja see ei nõua keerulisi instrumente, pakkudes paindlikumat ja täpsemat tehnilist meetodit ja üldist lahendust kohapealseks kiirtestimiseks-.